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液相色譜知識

高效液相色譜柱異常排除

2023-10-09 Vink

當(dāng)高效液相色譜(HPLC)柱出現(xiàn)異常時,可以采取以下步驟進行排除:


1. 檢查壓力是否正常:如果壓力異常,需要檢查泵是否正常工作,包括泵的流量設(shè)置、泵頭密封圈是否完好等。同時,檢查連接管路是否有堵塞、漏液等情況。

2. 檢查流動相是否正確:流動相使用不當(dāng)或緩沖鹽的結(jié)晶沉淀也可能導(dǎo)致雙峰出現(xiàn)。需要確保流動相的正確配比和PH值調(diào)節(jié),以避免對色譜柱產(chǎn)生不必要的損害。

3. 檢查色譜柱是否平衡:每次運行前要給予足夠的時間平衡色譜柱,以避免因色譜柱未平衡而導(dǎo)致的雙峰現(xiàn)象。

4. 檢查流速是否穩(wěn)定:流速的變化也可能導(dǎo)致保留時間漂移和雙峰出現(xiàn)。需要確保輸液泵流速穩(wěn)定,以避免對色譜圖產(chǎn)生影響。

5. 檢查進樣過程是否正常:進樣過程中進入空氣或樣品組分的吸收低于流動相,都可能導(dǎo)致雙峰出現(xiàn)。需要確保在進樣過程中避免空氣進入,并選擇合適的樣品組分吸收波長。

6. 檢查溫度控制是否適宜:溫控不當(dāng)可能會導(dǎo)致保留時間漂移和雙峰出現(xiàn)。需要確保柱溫箱溫度恒定,以避免對色譜柱產(chǎn)生影響。

7. 檢查過濾器是否堵塞:如果流動相或溶劑中存在雜質(zhì),可能會導(dǎo)致過濾器堵塞,從而影響流動相的流速和色譜圖的穩(wěn)定性。需要定期更換過濾器芯,并使用過濾后的流動相。

8. 檢查單向閥是否損壞:單向閥損壞可能導(dǎo)致液相色譜出現(xiàn)雙峰。需要更換損壞的單向閥。


總之,當(dāng)高效液相色譜柱出現(xiàn)異常時,需要從多方面進行檢查和排除,以確保液相色譜的正常運行和結(jié)果的準(zhǔn)確性。